随着规模化养殖加速发展，猪病变得极为复杂，仅靠传统诊断变得极为困难，实验室诊断就显得极为重要。目前从事猪病实验室检测服务的单位主要有：农业高校或科研院所、饲料厂或兽药厂及刚兴起的“第三方”专业检测机构等。这些服务机构提供的实验结果在准确性上存疑，或者不能对养猪场疫病防控提供切实可行的防控方案，这两方面缺陷导致不少养猪场对这些服务机构的检测不认可。规模化养猪场在内部建设兽医诊断实验室已逐渐兴起。本文对如何建立规范的猪场兽医诊断室做了如下综述。
1 猪场兽医诊断室选址
在养猪场内部，应选址在远离生产区、位于生产区下风向、排污设施下游的地方；若在养猪场外部，首先应考虑远离附近养殖区域，还应考虑远离居民区及饮用水源区域。
2 猪场兽医实验室建筑设置
猪场兽医诊断室一般应包括：解剖间，试剂室，会议室，档案室，实验室等五部分组成。实验室可细分为：细菌实验室，病毒实验室，分子生物学实验室，免疫学实验室等。如果实验室要开展PCR检测病原工作，为防止气溶胶污染则需将PCR室进一步划分配液区、扩增区及电泳区。
3 猪场兽医实验室仪器设备
猪场兽医诊断室仪器设备包括：解剖台、超净工作台或生物安全柜、高压灭菌锅、离心机、恒温培养箱、冷藏冰箱、冷冻冰柜、试剂柜、组织捣碎仪、精密天平、pH计、光学显微镜、试验操作台、PCR仪、电泳仪、酶标仪、档案柜等。
4 猪场兽医实验室人员配备
猪场兽医诊断室人员必须接受专业的教育或培训，懂兽医知识，能够分析检测结果，并将结果用于猪病防控指导。猪场兽医诊断室人员必须具有较强的生物安全意识，防止病原传播扩散，防止病原对自己的侵袭。猪场兽医诊断室人员必须爱岗敬业、不怕脏不怕累。
5 猪场兽医实验室工作内容
5.1 细菌分离及鉴定
猪场存在比较常见的猪细菌病有：猪大肠杆菌、猪链球菌、副猪嗜血杆菌、猪沙门氏菌及猪传染性胸膜肺炎等。首先是无菌采集适于细菌分离的病料；选择合适的固体培养基进行培养；根据其特性进行镜检、菌落形态观察、生化试验、动物回归试验及PCR方法等进行鉴定；挑取单菌落进行纯化培养。
5.2 药敏试验
药敏试验就是为了找到能够对本场细菌敏感的治疗药物，避免药物滥用。通常使用纸片扩散法做药敏试验。其原理是将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸收琼脂中的水分溶解后扩散形成递减的梯度浓度，在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制，从而形成无菌生长的透明圈。抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度。
5.3 血清抗体测定试验
猪场中测血清抗体主要有两方面用途：一是为了淘汰野毒感染（比如猪伪狂犬病、猪口蹄疫等）猪只；另一方面是为了评价疫苗免疫效果。血清抗体测定主要使用的方法是正向间接血凝、酶联免疫吸附试验（ELISA）、凝集试验等。其中ELISA方法用途最为广泛。猪场在使用ELISA方法测定血清抗体时，一定要选择正规厂家生产的ELISA试剂盒。
目前国家在有关猪病方面，国家标准物质欠缺，所以无法对猪病诊断试剂盒进行有效规范管理。猪病诊断试剂盒领域市场上存在鱼龙混杂局面，所以在选择猪病诊断试剂盒时一定要选择有实力有信誉的厂家。操作人员按照试剂盒提供的说明书操作即可。
5.4 病原分子生物学鉴定
猪病进行病原鉴定时，使用分子生物学方法进行快速鉴定，已获得业内专业人士普遍认可。分子生物学方法用途最广泛的是聚合酶链反应（PCR）或反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）。该方法一般先从组织病料中提取病原DNA或RNA，然后利用PCR仪器进行PCR扩增，用电泳仪进行核酸电泳。如果条件好一点的实验室也可选择荧光定量PCR仪器进行PCR扩增，无需核酸电泳。将PCR扩增产物回收，送专业测序机构进行测序，可获得病原基因信息，进而对猪场病原基因型进行鉴定，鉴定结果可用于追踪病原来源或选择合适菌株或毒株疫苗。
5.5 猪用生物制品的制造
有条件的猪场兽医诊断室可开展猪病高免血清和自家苗制备试验。猪病高免血清可用于猪病紧急接种治疗。制备高免血清应选用近期有过典型临床表现且明显康复母猪。制备好的高免血清需进行无菌试验或安全检验，然后才能在猪场推广使用。自家苗制备步骤：无菌采取病死猪的淋巴结、肺脏、脾、肾等病变器官；加适量生理盐水，用高速捣碎机制成组织匀浆，双层无菌纱布过滤；滤液再用生理盐水作适当稀释，最后加入经适当稀释的甲醛，置37℃条件下灭活；灭活完毕，取出置于4℃下，保存待用。在投入使用前，对自制的自家组织苗，进行安全性和免疫效果的生物学试验。
6 猪场兽医实验室质量管理
猪场兽医诊断室应制定一系列的制度，比如包括生物安全措施制度、人员岗位职责制度、仪器使用制度、试剂使用制度、实验室卫生制度、试验标准操作制度、病猪尸体无害化处理制度等的制定。检测人员进入实验室应进行登记，进行试验时要做好试验记录及实验报告，使用仪器及领用试剂应登记，试验结束要做好清场记录等。检测人员养成良好的工作习惯将有助于实验室的质量管理。
7 小 结
兽医诊断实验室建设的规模大小，应根据各猪场实际情况而定。但要坚持一点，务必使检测项目与解决猪场实际需要解决问题相适应，也要根据实际情况调整检测项目。成立实验室后需经常开展对外交流活动，比如派检验员进行业务培训或交流等，提高检测水平。
本文选自《猪业科学》2018年第7期“猪业论道”栏目：P123-124
